①操作者应做好个人防护工作，在生物安全1～2级实验室中工作的人员应穿外套式工作服;在3～4级实验室工作的人员应穿手术衣式工作服，手术衣的手套应能包住腕关节，必要时应戴面罩和眼罩。②操作前应将本次操作的全部物品移入生物安全柜，避免双臂频繁穿过气幕破坏气流;柜内物品摆放应做到清洁区、半污染区与污染区基本分开，方便操作过程中取用物品，且三区之间无交叉，物品应尽量靠后放置，但不得挡住气道口，以免干扰气流正常流动。柜内不放与本次实验无关的物品。③打开风机5～10min，待柜内空气净化、气流稳定后方可操作。将双臂缓缓伸入柜内，静止一会儿，待柜内气流稳定后按照从清洁区到污染区的顺序轻柔、舒缓地操作，避免影响气流和交叉污染。操作时不可打开玻璃视窗，面部应处在工作窗口之上，尽量减少背后人员走动和快速开关房门，严禁使用明火，以免干扰柜内气流稳定，且明火也容易损坏HEPA滤器。④操作时为防液滴溅出，可在台面铺上用消毒剂浸泡过的毛巾或纱布，但不能覆盖住生物安全柜格栅。处理溢出物时，不可将头伸入生物安全柜内，面部不可直接对着前操作口，而应处于前视面板的后方。如果溢出量少，可直接用消毒剂浸湿纸巾擦拭;如溢出量大或容器破碎时，要求广泛消毒，则先将柜内的所有物品表面进行消毒，再移出生物安全柜按操作规程消毒，选择消毒剂时需考虑其对生物安全柜的腐蚀性，使用消毒液的作用时间应维持在20～30min。如果溢出物流入生物安全柜内部，则需要对其进行熏蒸。⑤当出现报警或系统失效时应停止使用，查明原因确保安全后再使用。当生物安全柜或实验室出现持续正压时，室内人员应立即停止操作并戴上防护面具，采取措施恢复负压。如不能及时恢复和保持负压，应停止实验，及早按规程退出，并采取相应处理措施和通知相关人员.