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茯苓菌种的制备及菌丝的定性鉴别,菌丝的TLC检视

[导读]种前处理:接种室、洁净工作台打扫干净, 洁净工作台用75%的酒精棉球擦拭消毒, 将接种工具和灭过菌的培养基放在SW-CJ-2FD洁净工作台上, 开启紫外灯灭菌1h。接种时将茯苓菌核冲洗干净, 用纱布擦干水分, 移到接种室, 用酒精棉球进行表面消毒, 用解剖刀把菌核切开, 在洁净工作台上用镊子挑取中间菌核置培养基上。将培养基放于27℃培养箱中培养并观察是否有杂菌感染

菌丝的TLC检视;称取茯苓粉末 (本实验室采于安徽省金寨县桃岭乡桐岗村) 1g, 茯苓菌丝0.5g, 加乙醚50m L, 超声处理30min, 滤过, 滤液蒸干, 残渣加甲醇1m L使溶解。另取茯苓酸 (上海中药标准化研究中心, 批号:09-1016) 0.2011g, 加1m L甲醇溶解, 为对照品溶液。照薄层色谱法试验, 吸取上述4种溶液分别点于同一硅胶G薄层板上, 以甲苯-乙酸乙酯-甲酸 (20∶5∶0.5) 为展开剂, 展开, 取出, 晾干, 喷以2%香草醛硫酸溶液-乙醇 (4∶1) 混合溶液, 在105℃加热至斑点显色清晰。菌丝在色谱中, 在与茯苓药材色谱相应的位置上, 显相同颜色的主斑点, 且在茯苓酸斑点处有相同的斑点

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