0　前言 

目前国际上有关生物安全柜的主要标准有:美 国标准 NSF/ANSI 49 -2002e;欧洲标准 EN12469: 2000。2006年 6 月 1 日, 中华人民共和国医药行业 标准 《生物安全柜》 ( YY0569-2005)正式实施。 这些标准都对生物安全柜的生产和检测起到规范和 促进作用。然而, 在实际应用中, 由于气溶胶污染 物而引起的风险情况是无法用性能测试确认及消除 的, 所以还要采取风险评估的方法来预防风险情况 的发生, 或在其发生后将风险消除或减少到最小。 

1　生物安全柜简介及性能测试 

1. 1　生物安全柜定义及用途 生物安全柜 ( BSCs)是为操作原代培养物、 菌 毒株以及诊断性标本等具有感染性的试验材料时, 用来保护操作者本人、 试验室环境以及试验材料, 使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性 气溶胶和溅出物而设计的。

1. 2　生物安全柜常见性能测试 目前各项标准都详细规定了安全柜的各项测试 方法及要求。其中, 对人员保护、 受试样品保护、 交叉感染防护的测试显得尤为重要。 人员保护:用 1×108 ～ 8×108 个/mL 的枯草芽 胞杆菌芽孢进行试验 5min 后, 从全部撞击采样器 收集的枯草芽胞杆菌菌落形成 CFU 数量应不超过 10。狭缝式空气采样器培养皿中枯草芽胞杆菌计数 不应超过 5CFU , 对照培养皿应成阳性。重复试验 三次, 每次试验均应符合要求。 受试样品保护: 用浓度为 1×106 ～ 8×106 个/mL 的枯草芽胞杆菌芽孢进行试验 5min 后, 在琼脂培 养皿上的枯草芽胞杆菌芽孢就不超过 5CFU, 对照 培养皿应成阳性。重复 3 次, 每次试验均应符合要 求。 交叉感染防护:用 1×104 ～ 8×104 个/mL 的枯 草芽胞杆菌芽孢进行试验 5min 后, 有些从试验侧 壁到距此侧壁 360mm 范围内的琼脂培养皿检出枯 草芽胞杆菌, 并用作阳性参照。距被检测壁360mm外的琼脂培养皿检出枯草芽胞杆菌不应超过 2CFU, 从安全柜的左侧和右侧均各重复三次, 每次试验均 应符合要求。 

1. 3　生物安全柜存在的问题 目前在生物安全柜的应用中, 大部分人员都将 注意力放在生物安全柜的各项测试参数和标准上, 只注重生物安全柜中的产品可能会对操作人员、 环 境造成污染, 以及环境中的空气若吸入安全柜会对 产品产生污染。实际上操作人员也可能会对产品及 试验材料造成威胁, 人的动作, 包括手臂的伸入以 及走动都可能对产品产生影响。此外, 开关门窗, 运输设备也会对安全柜内气流产生影响。 

2　风险控制方法简介 

2. 1　LR-method 步骤 风险控制方法 ( LR-method)为评估洁净区域 中, 气溶胶污染物潜在的微生物风险提供了一个可 靠、 系统的方法。主要通过以下步骤实施: ( 1)气流运动可视化 (例如, 烟雾法)来确认 湍流区域和重要的旋涡。 ( 2)风险测试, 确定潜在风险情况。首先将粒 子计数器的探针放在操作区, 在正常操作下这一区 域内的试验品是暴露的。在相邻的周围空气中产生 粒子 (例如使用气流试管)达到风险水平, 即每立 方英尺有超过 300, 000 个粒子尺度≥0. 5μ m 的粒 子 (大约 107 个/m3) , 连续记录粒子总数。这些测 量必须是在生产操作的同时进行。 ( 3)通过计算风险因数来评价风险情况, 风险 因数被定义为在操作区域测得的粒子浓度 (个/ft3) 与周围空气风险水平的比值。由于高浓度时测量精 度的有限, 所以在所有风险因数的计算中均采用每 立方英尺有超过 300, 000 个粒子尺度≥0. 5μ m 的 粒子 (大约107 个/m3)作为风险水平。

2. 2　LR-method引入的意义 这种方法可以用于追踪气溶胶污染物的扩散 源, 确定风险情况, 评价与某一步骤有关的风险, 进行即时评估, 预测潜在风险。使用 LR-method 可以确定特殊的风险情况, 从而避免风险的发生, 或者减少发生的机率以及持续时间。 

3　结论 

在生物安全柜的使用中, 人们习惯把药品、 试 验材料作为污染源, 而忽略了人的动作、 设备的转 移等都可能对产品造成威胁。实际上, 人员是主要 的污染源。设备和人员的运动都对产生气溶胶污染 物风险有很大的影响。对生物安全柜仅采取性能测 试是无法对潜在的风险进行评估的。为了更好的保 护产品、 环境、 试验人员, 作者建议在对生物安全 柜采取性能测试的同时进行风险评估。只有通过风 险评估才能对潜在的风险进行确认, 并及时采取有 效的措施进行控制。