生物安全柜是一种负压箱式结构的安全设备， 用来保护操作本人、实验室环境，避免操作原始 培养物、菌毒株以及诊断标本等具有传染性的实验 材料时可能产生的传染性气溶胶和溅出物[1,2]。二 级生物安全柜是目前应用最为广泛的柜型[3]。按照 NSF49 中的规定，二级生物安全柜内的气流在前操 作台挡板处被下吹的气流屏蔽阻断，保证了生物安 全柜外环境及人员的安全[4,5]。 根据结构设计、排风比例及保护对象和程度 的不同，生物安全柜分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级。Ⅰ级生 物安全柜仅保护人员和环境，不保护样品; Ⅱ级生 物安全柜不仅能提供人员保护，而且能保护工作台 面的物品以及环境不受其污染，Ⅱ级生物安全柜又 可以分为A 型和 B 型，A 型包括Ⅱ级 A1 型和Ⅱ级 A2 型，B 型包括Ⅱ级 B1 型和Ⅱ级 B2 型; Ⅲ级生物 安全柜是一种完全封闭的、彻底不泄漏的通风安全 柜，通过连着的橡胶手套来进行安全柜内的操作， 俗称手套箱(Gloves box)，试验品通过双门的传递 箱进出安全柜以确保不受污染，适用于高风险的生 物试验[6,7]。

目前世界上最通用的生物安全柜国际认证是美 国的 NSF/ANSI 49 和欧盟的 EN12469，这两种标 准对安全柜性能分级、安全性能检测都有详细的说 明和要求。我国分别在国标 GB19489-2004 及 GB50346-2004中规定了二级生物安全柜的物理技术 指标及检测方法。生物安全柜标准的制定及认证对 规范安全柜市场及保护环境与研究人员起到了重要 的作用。 随着生物安全实验室的建立及生物安全实验的 广泛开展，我国出现了为数众多的生物安全柜生产 厂家。生物安全柜污染控制性能是指安全柜确保所 有的危险颗粒不从操作窗口逃逸出去的能力。一台 生物安全柜也许可以通过所有的气流等物理测试， 但不一定能通过污染控制性能测试。为了准确检验 我国制作的生物安全柜的技术指标，全面对生物安 全柜进行安全评价，我中心环境检测实验室与比赛 福公司联合对国产Ⅱ级生物安全柜样品进行了物理 及生物指标检测与安全评价实验[8~10]。

1   材料

1.1   样品 样品制造商: 北京某生物安全柜制造厂。样品 名称: BSC-1100型 CLASSII A2﹑ BSC-1360型 CLASSII A2 型生物安全柜。

1.2   检测依据 物理指标: GB50346-2004生物安全实验室建筑 技术规范、GB 14925-2001实验动物环境及设施; 生 物学指标: GB19489-2004实验室生物安全通用要 求、NSF /ANSI492 2002。 

1.2.1    物理指标    a. 噪声; b. 照度; c. 生物安全柜垂 直气流风速; d. 生物安全柜工作窗口气流风速; e. 工 作窗口风向。 

1.2.2    生物指标    a. 保护人员的生物安全检测; b. 保 护样品的生物安全检测; c. 防交叉污染的生物安全 检测; d. 高效过滤器对环境保护的生物安全检测。 

1.3   检测仪器 ST-85照度计(师大光电); HS5633数字声级计 (北京检测仪器厂); TSM-1A电风速计(北京检测仪器 厂);轻质丝线。气溶胶发生器(WesTech Engineering, Inc); 气溶胶采样器(WesTech Engineering, Inc); 指示菌。

2   实验方法

2.1   生物安全柜物理检测项目与方法

按照“GB50346-2004生物安全实验室建筑技 术规范”进行物理指标检测[8]。 

2.2   生物安全柜生物检测方法 2.2.1   气溶胶发生器    (1) 全玻璃直角喷雾器, 喷雾 压力18 kg/cm2, 喷雾空气流量15 L/min, 喷出量15～ 110 ml/min。 (2) TK2 同心圆发生器, 喷雾压力 110 kg/cm2，喷雾空气流量 10 L/min，喷出量 15 ml/min。 

2.2.2   气溶胶采样器   (1) 全玻璃液体冲击采样器 (AGI2102111), 采样空气流量7 L/min, 采样10 min。 (2) JWL 21 型空气微生物采样器, 采样空气流量 25 L/min, 采样10 min。 (3)A1S 生物粒子采样器, 采 样空气流量2813 L/min, 采样时间30 min。 

2.2.3   指示菌  粘质沙雷氏菌。挑取单菌落于营养 肉汤中，37℃，160 r/min,12 h，磷酸盐缓冲液 稀释后测定浓度。采集置37 ℃温箱中培养24 h后 计数平皿的红色沙雷氏菌落数。