NSF-49是由NSF Intemational—— 一个独立的、非赢利性的、非政府组织制定的Ⅱ级(层流式生物安全柜的标准号。2002年颁布的是最新版，同年被美国国家标准化组织指定为美国国家标准。该标准指出生物安全柜的设计是将从事1— 4级生物危害因子操作中所产生的危害降至最低，述及7个方面内容：概述标准使用范围；列出所有引用的标准；对24个生物性、技术性名词作定义，其中对生物危害、生物安全级别、生物安全柜种类作详尽解释；对材料性能结构提出具体要求；详述生物安全柜的设计制造及性能要求；通过大量附件和图介绍12种性能测试方法并规定应达到的技术标准；附件中还列出现场测试方法、校验、校准方法及有关生物安全柜安装和放置的建议以及大量的参考标准和规范。

一、生物危害与生物安全防护…

标准将生物危害定义为传染因子通过直接感染或环境播散引起间接感染的方式对健康人体、动物、植物造成切实的或潜在的危害。根据微生物感染性、传播性严重程度不同分为1—4级。与之相对应，实验室应具备的生物安全防护措施也分1—4级。

1．生物安全1级(BSL一1) 实验室配备的设施、安全设备及人员的操作适合中等或高等教学培训或实验教学。接触已知的不引起健康成人致病的活的微生物如枯草杆菌、传染性犬肝炎病毒等。但应注意这些微生物可能对儿童、老人、免疫缺陷或免疫抑制个体感染。

2．生物安全2级(BSL-2) 实验室配备的设施、安全设备及人员的操作适合临床诊断、教学。工作中接触人类血液、体液、组织或原代人体细胞等未知感染因子或接触广泛存在社区的可引起人类各种疾病的中等危害程度的病原体。如乙肝病毒、人类免疫缺陷病毒、沙门菌、弓形体等。这些因子可经皮肤粘膜接触或通过吸人、摄人方式引起感染。若操作中气溶胶产生的可能性低，操作人员有好的微生物操作技术，这些操作可在敞开的实验室内进行；若操作中产生气溶胶或有液体严重飞溅现象，虽然某些病原体不经空气传播但仍可增加操作人员感染的危险性，这种操作应在生物安全柜内进行。此外，离心时应用安全离心杯，操作时应穿工作服、防护服、戴手套、护镜以及护脸罩。实验室必须设洗手池、废物处置设施等，减少对环境的污染。

3．生物安全3级(BSL一3) 实验室配备的设施、安全设备与人员操作适合临床诊断、教学、科研、生产。实验接触本土的或外来的具呼吸道传播可能的或引起严重的、可致死感染的病原体，如结核分枝杆菌、圣路易斯脑炎病毒、伯纳特柯斯体等。这些因子可通过自体接种、摄人或吸人感染性气溶胶引起感染。所有操作应在生物安全柜内进行。实验室应按遏制实验室要求建造，有通风设施，保证感染性气溶胶的释放降到最低限度。

4．生物安全4级(BSL-4) 实验室配备的设施、安全设备与人员的操作适合于危险的、外来非本国的病原体。他们主要通过气溶胶传播，对个体有高度危险性，对社区造成严重危害。工作中因接触具有潜在感染性的样品、分离物、感染性动物等，通过粘膜吸人气溶胶、经破损皮肤接触感染性液滴、自体接种等引起危及生命的感染并通过直接或间接方式很快传播。目前，对这些疾病尚无有效的治疗方法和预防接种的疫苗。生物安全4级实验室是严格遏制实验室，与外界完全隔离，具有专门的供气设备和废物管理系统，防止活的病原体向环境扩散。通过在Ⅲ级生物安全柜中操作，人员可完全避免与雾化的感染性物质接触。

二、生物安全柜的选择¨

生物安全柜分I级、Ⅱ级、Ⅲ级。I级生物安全柜适合于检验样品或产品不需要保护的操作；Ⅱ级生物安全柜用于保护人、样品、环境的操作，有A1、A2、B1、B2 4型。除A1型外，均适合产生毒性化学物质或放射性物质的操作。Ⅱ级A型生物安全柜的特点是没有硬管式排气管道，HE—PA滤过气体的30％排人实验室，70％组成覆盖样品垂直气流中的一部分。A1、A2的不同之处是A1型生物安全柜允许污染风道和静压箱为正压而A2型的只允许为负压。Ⅱ级B型生物安全柜内HEPA滤过气体通过硬管道排出，B1型生物安全柜排出气体中有30％可循环，B2型为100％全排。Ⅲ级生物安全柜为全密闭结构，通过联在上面的橡胶手套在柜中操作。柜内处于120 Pa的负压。进入柜内气流经HEPA过滤，排出前经双重HEPA过滤，是规格最高的生物安全柜。

三、生物安全柜材料与设计构造要求

制造生物安全柜的所有材料都要求耐磨、抗腐蚀、防碎裂、防火防潮、无毒无嗅，由结构合理稳定的材料制成。设计和制造生物安全柜时应考虑操作安全、对人员、样品和环境具保护性、方便洁净、性能良好，为此提出3O款具体要求，见表1。

四、生物安全柜性能要求…

标准要求测试机构应根据附录A 的试验测试，除了进行设置点气流速率测试以外，所有可拆卸的部件在测试时均应处于原位。各项测试结果均应符合相应的技术要求，见表2。制造商应按照附录A的操作对以下项目作质量控制试验：压力减退、皂泡、气体探漏；HEPA过滤器；向下速率；流速；气流烟幕模式，其技术指标应符合相应要求并提供每一台安全柜的性能资料。噪声、照明、振动等附加试验的质量控制结果应符合要求，每l0台产品报告1次。标准还规定保存生物安全柜的近期(1年内)校正记录及3年质控试验测试结果。

五、现场测试

标准列出l0项现场测试方法(见表2标“：一c”处)并规定每台Ⅱ级生物安全柜在安装后及每年进行现场测试，评价已安装的生物安全柜满足现行标准的设计要求。此外，更换HEPA过滤网、安全柜内部零件维修、安全柜移位时，均需重新测试；从事特定危险物质操作、关键部位的超负荷运行，通常应考虑重新测试。若现场测试结果符合标准要求，应在生物安全柜前最明显位置张贴测试结果记录。记录包含以下信息：测试日期；应复检日期(最迟于×年×月×日)；测试报告编号；检测公司名称、地址、电话；现场测试人员签名。