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生物安全4级隔离实验室的安全事项

[导读]从多个角度详细介绍了生物安全4级实验室的两种运行模式— — 配备Ⅲ级生物安全柜或穿着4级防护服及与此相关的安全事项。

生物安全4级(BSL一4)隔离实验室数量在不断增加。在上世纪8O年代早期,这样的实验室北美仅有2个,1个在亚特兰大的疾病预防和控制中心(CDC),1个在美国陆军传染病医学研究院(USAMRIID)。到2005年初, 美国至少有6个处于运行状态的生物安全4级实验室,而世界上也已超过12个。加拿大也有一个生物安全4级实验室研究人类和动物的疾病媒介。
造成疾病的发病率高、死亡率高的病毒,如Nipah和Hendra,是最近才发现的。而如埃博拉(Ebola)病毒等其他一些病毒还在不断再现。上述这些专业实验室的出现和数量的增加,是由于对生物恐怖主义可能会使用已根除疾病— —天花为武器的关注,还有美国疾控中心(CDC)和美国农业部(USDA)对选定的媒介进行研究不断增加资金。新的生物安全4级实验室对研究自然疾病和可用作生物威胁的媒介乃必不可少。
生物安全4级生物体引发的疾病数量在不断增加,这也使一般用来应对这类事件的政府实验室的工作负担不断加大,从而有必要重新分配资源,允许私有的和商业的实验室也进入生物安全4级病毒的研究领域。现在越来越多的资源用于应对生物恐怖主义的准备工作;曾经是政府实验室统领的工作, 现几乎已成为公有和私有部门的常规工作。最近10年中,越来越多的大学和私人组织已开始实施生物安全4级研究计划。
随着建造新的生物安全4级实验室使用的资源更多,经过安全与风险评定程序正规培训的人员和生物安全专家的人数成了制约因素。拥有生物安全4级实验室安全运行知识和“实际”经验的人员和安全经理人数极少,这使得经过相应生物安全4级安全和危害评定的培训及经验的人出现需求。除了预防和应对自体接种或其他接触生物安全4级媒介有关的那些显著问题外,与生物安全4级实验室活动有关的具体危害和风险方面的出版物极少。鉴于与生物安全4级实验室事故有关的后果问题,最高隔离实验室的人员要认识到具体的危害并能采取适当的行动,这点非常重要。本文的目的就是为那些参与生物安全4级实验室运行的人们,说明基本的安全问题和风险评定要点。生物安全4级安全事项的一个主要内容就是培训,这里讨论了具体的培训问题。在设计和建设生物安全4级实验室的初期就把危害减少到最低程度,与在运行的实验室中识别出可能立即发生的、致命的情况同等重要。本文还讨论了为减少这些独特实验室每日的操作风险所要考虑的基本设计和工程问题。
生物安全4级综述
如果人员都经过正确的培训,能够正确地实施生物安全4级的作业,则生物安全4级实验室应该是所有微生物实验室中最安全的。如果每件事都操生物安全4级隔离的概念在原理上很简单:把传染性媒介与工作人员隔开。方法有二:(1) 把媒介密闭在一个隔离的密封箱或柜内(III级安全柜),从密闭箱外部通过柔性的、无渗透性的接口性装置(一般是手套)进行操作;(2)把人员密闭在一个自我隔离的、带送风的正压防护服内。认可的导则允许综合采用上述手段,但都要能防止接触生物体,能实施操作,而不污染实验室人员或环境(CDC/NIH, 1 999,2006)。
III级柜(图1和图2)为生物安全4级媒介的研究工作提供最经济的保护。特定研究目标(如处理多个媒介)和人员事项(如研究人员的数目、身体疲劳、柜用手套的易损性、可用空间、是否需避免交叉污染等)等因素,都使IⅡ级柜使用上的灵活性受到了制约。
另一种方法是在实验室穿戴生物安全4级防护服,这样,在实验室内的活动可几乎不受限制。依实验室的设计,可由穿着防护服的多人同时处理多种媒介,不舒适感和疲劳都较少。实际上,生物安全4级实验室有着大型Ⅲ 级安全柜的特性,实验室的密封内壳起到隔离区或外壳的分界作用。这类穿戴防护服的实验室很大的不足之处是建设费用及后续的维护和支持问题。一般由于实验室所进行的工作、实验室安全特性或实验室获得的传染等方面沟通不够充分,使得这两类实验室都会引起社区的注意。

生物安全4级的每种隔离方法都使得这类实验室很独特,值得给予特殊的安全考虑。生物安全4级实验室的最终目的是,为工作人员所处理的、其传染的疾病没有治疗方法的媒介,尽量提供最安全的环境。生物安全4级实验室中最严重的事故可能会是活媒介的直接自体接种,或者是防护服或手套破裂,导致人员与气溶胶接触或粘膜接触。而生物安4级实验室中存在的许多常见危害,可能会在无意间造成接触事故。生物安全4级环境中的人必须与熟悉较低级实验室的人员视为普通的、或是可以预防、或是出事后用抗生素很容易治疗的那些问题进行斗争图生物安全4级实验室中的普通危害,可能因为没有疫苗或治疗方法而会危及生命,并可能对个人、工作同事及社区带来严重后果。虽然现在没有生物安全4级传染性媒介在其附近社区传播的实例,但曾有实验室人员受感染和死亡的报道。2004年报道过两例生物安全4级实验室Ebola病毒工作人员的事故,其中一例是由针刺伤造成的。有的事故是由明显的危险(受污染的锐利物和被受传染的动物咬伤) 造成的,而对看来似乎简单的操作(如用剪刀切割纸张或从配料器上撕下胶带)隐藏的不明显危险,还有待于认识和避免。生物安全4级人员的物理隔离状态,不仅使得在需要时难以实施救助,而且对某些人可能还有心理上的影响。
生物安全4级媒介
目前在生物安全4级隔离环境下处理的病毒有下述7大类属:Arenaviridae(胡宁病毒、拉萨病毒、machupo病毒、Sabia病毒等),Bunyaviridae(如Crimean.Congo出血热病毒类的hantaviruses和nairoviruses),Filoviridae(Ebola病毒和马尔堡病毒),flaviviridae(中欧蜱传播的脑炎病毒综合症、Omsk出血热病毒、科萨努尔森林病毒和俄罗斯春夏脑炎病毒),Herpesviridae(Cercopithecine疱疹病毒1 , 以前称为疱疹B 病毒),Paramyxoviridae(Nipah病毒和Hendra病毒)及Poxviridae(重型天花即天花病毒)。这些对人有剧毒,可能由气溶胶途径传染,对美国一般属外来的。它们能够直接在人之间传播,所引发的疾病目前还没有预防和治疗方法。自上世纪90年代早期以来,已发现几种新的病毒。在生物安全4级隔离环境下对Nipah病毒和Hendra病毒进行了研究,并对汉坦病毒进行了生产水平的工作(CDC,1994)。其他生物安全4级病毒,如Ebola Reston, 由于动物的进口和人员的流动等,已在世界上想不到的地方有所发现(CDC,1 989)。现在,用活天花病毒进行的研究工作,只在有限地方的生物安全4级实验室中进行。虽然没有定为生物安全4级的细菌,但对具有多种抗药性的细菌进行的风险评定,还是提倡采用生物安全4级的隔离环境。
微生物和生物医学实验室的生物安全(BMBL)中的生物安全4级生物安全导则
CDC和NIH已经在BMBL中颁布了所推荐的实验室生物安全导则。其中按升序说明了涉及传染性微生物和实验室动物的4个级别的生物安全工作,对人、环境和社区提供逐级增加的保护。实施这些导则并不能保证生物安全4级水平上安全的各个方面。
BMBL建议,凡是所处理的、不论是已知的或是具有潜在传染性的物质,如所来自的节肢动物、动物或人怀疑带有生物安全4级病毒媒介,都要采用生物安全4级的规范与隔离。疑似或已知受到生物安全4级媒介传染的人的临床标本,也要交由生物安全4级实验室做医学诊断。对新的或未分类的高死亡率病毒媒介,如果已知或怀疑可经气溶胶传播,也应该在生物安全4级隔离环境中制备。在生物安全4级实验室中对任何新的媒介进行工作前,应该依据各种已知的分类对其进行风险评定(CDC/NIH,1999)。表1归纳了实施传染性微生物和实验室动物工作的生物安全内容。鼓励读者仔细查阅BMBL中各个生物安全级别的具体部分.
生物安全4级风险评定和风险管理考虑生物物质(如微生物、毒素、诊断样本和环境样本)计划有一个重要的内容, 即熟悉待处理的对象和所遵循的程序。调查员在工作前需要从目前的文献和同行处了解详细的信息。对生物媒介的概要性说明、技术性出版物和其他文件可能含有进行风险评定所需的信息。调查员应进行工作危害分析,考虑进行与这些物质有关的工作时, 实验室人员要遵循的书面程序中的所有步骤。使用风险管理方法对每个步骤进行分析(见表2的样本表格)。
个人必须细阅并签署此文件,证明已经读过并理解了其内容。此工位危害分析用以识别可能与实验室内的工作或动物的工作有关的危害(生物媒介和毒素以及环境的、心理的、物理的和医学的危害)。这一级隔离条件中的生物媒介作业,涉及高致病性微生物及毒素的工作,定性为危险的或外来的。接触后可能患致命性疾病的风险很高。目前除了天花病毒和一些中欧脑炎病毒外,还没有可防护生物安全4级媒介的疫苗。关于危害控制中提及了与生物媒介相关工作之风险管理,一次和二次防护方面的信息。在风险管理(陆军指挥部现场手册100—14,1998)中还含有风险管理方法方面的信息。
环境危害包括身体危害(滑倒、跌倒和跌落)及与动物、锐利物和高、低温物质工作相关的风险。在最高隔离实验室中工作还必须注意的其他危害如下:
· 破碎、夹挤、穿孔(气闸门、快速切断、设备移动、气瓶和服装穿孔或撕裂)
· 水和其他液体(溢出、滑倒、跌倒和跌落)
· 物理效应(冷热的伤害、因身体活动和干风而脱水、低温以及高压消毒器及其他设备的热表面)
· 心理效应(身体上和感觉上的隔离及幽闭恐怖症)
· 氧气不足(防护服呼吸用空气的供应或配送中断)
· 电气(水浴和接地设备)
· 锐利物(针头、手术刀、剪子、实验室中的锐利表面和玻璃物品【试剂瓶和小瓶、血液管、毛细管和显微镜玻片】)
· 化学品(甲醛蒸气灭活和酚醛过敏反应)、怪味(如灵长类动物的气味)和室外空气的污染(如柴油和烟气)
· 低温物质(液氮和干冰)
● 压缩气瓶
· 辐射(放射性物质和混合废物处理及迦玛辐射危害)
· 动物的管理(动物脾性、麻醉和化学品管束、咬、针刺、逃跑的动物和尸体解剖的安全问题

配备⋯ 级生物安全柜式的实验室
III级生物安全柜
Ⅲ 级生物安全柜设计用于生物安全4级的微生物媒介,它既为人和环境免受传染性气溶胶危害提供最高级别的保护,也保护研究物质免受微生物污染(CDC/NIH,2000)。III级柜是专门的通风型生物安全柜,是全封闭的、气密的、自我隔离的。人们经常错误地将其称为手套箱,但手套箱可能既不通风,也不分级,可能也不具备Ⅲ 级生物安全柜的许多其他特性。
在柜内是用与柜连接的、手臂长短的橡胶手套(不渗水、柔性、18-20 mil厚)进行工作,如图1所示:或是使用连接在柜内密封的前板口上的半身服,则既可操作柜内的物品,又在媒介和工作人员之间建立一个物理屏障。
III级柜在负压下运行(0.5 in.水柱),用经HEPA过滤的空气进行通风。排风经两个串接的HEPA过滤器过滤后排放。柜内工作所需的任何设备,如气溶胶装置、恒温孵化器、冷冻装置和离心装置,必须装在柜系统之内。III级柜的一个组成装置是双门高压消毒器,用来为送出柜的所有物质灭菌并用来将供应品送入柜内。柜内还有一化学液槽, 为从柜内送出的物质灭菌或消毒。
IⅡ级柜还可指柜式流水线:几个柜连接起来组成一个系统。IⅡ级柜的制造与性能, 目前还没有国家公认的相关标准。图1和2是典型的Ⅲ 级柜。图3勾划的是一个装配Ⅲ 级柜的实验室。表3归纳了III级生物安全柜的优缺点。

配备⋯ 级柜的实验室的要求
配备III级柜的实验室应位于一单独的建筑内,或是与同一建筑内其他作业隔离开。人员必须经过至少两道门才能到达Ⅲ 级柜。生物安全4级实验室内有专用淋浴室将更衣室隔开。淋浴室和更衣室可以分为男女,也可不分。配备有联锁的双门高压消毒器、液槽、熏蒸舱或通风的前室,可供物品出入隔离区。此外,配备III级柜的实验室还有如下标准
· 在进入实验室并开始工作前,每日都要检验隔离参数和对生命必不可少的功能。
· 墙壁、地板和顶棚要专门建造, 以形成密闭的内壳进行灭活。
· 所有穿洞都要密封。门周围的开口要能密封进行灭活。
· 排水直接与废液灭活系统相连。
· 排污放气和污水管线,经HEPA过滤,并可防护害虫。
· 台面要密封,不渗漏液体。
● 用具用无孔的、便于灭活的材料制造。
● 非触摸式洗手池位于柜式系统和更衣室的入口处。
· 集中真空设备都配HEPA过滤,不用于配有安全柜的实验室以外的区域。
· 喷水式饮水器要自动的或脚踏的,并与实验室给水隔开,且位于配备安全柜的实验室之外。所有的给水管均要配备防回流设备。
· 入口门为自闭式、可锁。
· 窗户要防裂、密封。
· 配备双门高压消毒器供离开Ⅲ 级柜或房问的器物使用。
· 向隔离区外开启的高压消毒器,要用生物密封方法密封在隔离屏蔽墙壁上。
· 高压消毒器的门要联锁,只能在灭菌周期结束后打开。
·配备液槽等装置对经不住高压热的器物进行消毒。还可用液槽将物质传送到另一个隔离等级类似的区域。
· 对来自受污染的或可能受污染区域的、或其他源白柜内以及实验室内的废液,用加热或其他有效方法灭活。将任何废液排入污水管道前,其灭活方法要经过验证。
· 如州或当地法规允许, 洁净区域的废液可不处理排放。
· 实验室要有专用的、非循环的方向性通风系统。
· 进入实验室前,要监测报警系统,还必须用直观方法检查压差。
· 柜排风系统的设计和连接要能防止出现正压。
· 送风和排风都要经HEPA过滤;HEPA过滤器每年都要测试和认证。
· 设计和操作程序均有文件记录。
● 柜系统要每年或凭经验进行验证。
· 在柜区和非隔离区之间必须配备适当的通信系统。
⋯ 级柜安全方面的考虑
当主要危害都被限制在柜内时,生物安全方面考虑的问题就是,防止切口、裂口、手套有洞,或其他与柜的隔离系统有关的因素造成的接触。配备Ⅲ 级柜的生物安全4级实验室的安全方面要考虑的其他因素如下:

· 柜的操作参数
· 柜的维护和认证
· 柜内对锐利物的处理
· 对事故的反应
· 手套的更换
· 对生物媒介的处理
· 对动物的处理
由于在III级柜中长时间工作令人极端疲惫,因此,对实验的细致规划和组织、人员的技术熟练程度及其对正常操作和可能发生的任何事故的反应,都与安全问题直接有关。
穿戴个人防护服的实验室防护服
在生物安全4级环境中工作时,要与所处理的病毒性微生物分隔开。防护服就是专门设计的服装,用耐化学品的塑料材料制造,含有单向阀门及接头,可包纳源自外部的送风。世界上生物安全4级工作使用的防护服至少有两种: 第一种叫做Chemturion,是可重复使用的A级服, 由美国特拉华州的ILC Dover公司制造,多年来被广泛使用。Chemturion~由氯化聚乙烯制造,重量为10—18磅。第二种是由法国Delta Protection公司制造,在美国用得更多些。该服是用较轻的聚胺材料制造,外涂一层PVC,重量约为8~10磅。
Chemturion服的呼吸空气是由一个带有HEPA过滤器的调风软管输送。该软管可以与分布在整个离区域的空气管线快速连接或快速断开(图4为一配备生物安全4级防护服的实验室)。通过一个内置5又集管将空气分配到人的肢体部分和头部区域。60% 的空气分配到头区,每个肢体接收10%的空气量。位于服装背部和腿部的4个单向排风阀用以阻止室外空气进入服装。在进入生物安全4级实验室前,应检查空气管线的接头以及HEPA过滤器容器与软管系统, 以防渗漏, 保证气密性(Delta服外部的HEPA过滤器容器由内置一体式HEPA过滤器取代)。生物安全4级的人员要频繁检查连线,确保防护服除了在实验室内更换接头时之外,都与空气管线连接良好,以防窒息。还必须保持防护服内为正压, 防止实验室内可能受到污染的空气,通过看不到的孔或裂缝进入防护服内。依据厂家或实验室规范的要求,可以把靴子作为服装设计的组成部分。否则,就必须穿防水靴或套鞋以保护脚。
生物安全4级的人员和受训人员必须完全熟悉防护服的管理、使用和维护。新人应学习如何选择最适合自己身体的服装及如何正确地维护服装。一般的生物安全4级防护服的主要构成部分有:
· 面罩、上身及脚的部分
· 拉链或服装的闭合
● 护目镜
· 整体式空气分配集管和管线
· 呼吸用空气管线、HEPA过滤器容器或一体式HEPA过滤器和空气管线联接器
· 单向排风阀
· 模压的袖口
手套
手术手套的外面必须套上一双(约20 mid 厚的防护性乳胶手套。外手套用粘性聚丙烯带或胶带直接附在防护服的袖口上。内里的手术手套用胶带粘在防护服里面穿着的工作服上。虽然外面的手套增加了对手的保护,但降低了触觉的敏感性和敏捷性。如果手套尺寸不合适,戴两副手套还会引起手掌和手指肌肉夹痛。两副手套之间可施以滑石粉作干润滑剂以减少摩擦和夹力。对乳胶敏感或对乳胶过敏的人,应配备非乳胶代用品,并通过医药监视计划对其进行严密监视。
如使用III级柜,则外手套一般被认为是防护性最弱的环节,因为它在不断地接触、处理材料并有磨损。戒指或其他首饰可能会夹住或撕破防护服的材料或手套,必须在更换防护服前在外面的更衣室摘掉。
消毒剂等化学药品也会损坏手套的材料。人员应该接受培训, 以识别手套变质、干朽和材料的不相适性等情况,并且学会在生物安全4级隔离区域内修理手套的裂痕和裂口。究竟采取什么行动,取决于手套破损程度和皮肤的完整性是否遭到破坏。建议对现场实施严格检验,用消毒剂冲洗该区域并尽快撤离生物安全4级实验室。必须制定手套和服装修理现场专用的标准操作程序(SOP),并写入生物安全4级实验室安全手册中。

听力保护
送入ILC Dover Chemturion防护服的空气噪声级约为85~90 dB,要采取听力保护。美国劳工部2004年要求制定听力保护计划。应该教会设施听力保护计划中涉及的生物安全4级实验室人员,穿戴防护服时如何保护听力。一般情况下使用两种听力保护方法中的一个:泡沫塑料或乳胶耳塞,或者耳罩。个人使用哪种最好,重要的是顾及舒适及无异物感。耳塞为首选,因为耳罩体积大,在防护服内易从耳朵上滑落,使工作时不适并使人分心,造成危险。
配穿戴防护服的实验室的要求
穿戴防护服的实验室的隔离要求与配备生物安全柜的实验室具可比性,防止无意接触生物媒介或防止生物媒介传播的措施也相似。由于在与Ⅲ 级柜同等隔离的空问内(只不过较大),人员等于是穿着一个带拉链的袋子,因此实验室的差别主要是在基础设施和生命保障设施。
在穿戴防护服的实验室中,生物安全4级的活媒介的工作,都限制在特殊设计的工作服着装区域,着装的人员通过气闸进出。人员在离开隔离区域前先要进行化学消毒剂淋浴,然后进行个人淋浴,再离开实验室。与配备IⅡ级柜的生物安全4级实验室的要求相同,所有通入着装区域内壳的穿洞都要密封。生命保障系统的关键部件是备份的呼吸用空气压缩机、报警和备用应急呼吸气罐。
着装区内的空气压力要保持得低于相邻的实验室区域,并配备应急照明和通信系统。实验室排风系统、生命保障系统、进出控制和其他关键隔离系统与备用应急电源相连。要对这两种生物安全4级实验室进行全面比较,请见BMBL (CDC/NIH,1999)中“实验室生物安全等级标准”。使用个人防护服的优缺点见表4。

人员的适合性
由生物安全4级科技人员(实验室主管或委派者)和安全人员从待选人员中选择合格的人员在生物安全4级环境中工作。生物安全4级的主管负责保证每个在职责上需要进入高等级隔离环境的雇员,包括维护员工和应急响应人员,都经过适当的安全定位和培训。实验室主管或设计师必须确保,在实验室工作的每个人员都理解并完全掌握各种操作、维护和紧急反应的全部细节。由主管最终决定候选人员是否适合生物安全4级实验室的工作。有高等级隔离操作方面丰富知识的安全官员也可参与此项决策。在隔离(“热”)条件下进入隔离区域的任何作业,都应经实验室主管和安全官员,如生物安全官员(BSO)的批准。允许进出人员有:指派的实验室技工和微生物学家、实验室工程师、维修技工和保障人员等。
生物安全4级实验室对新手或没有耐心的微生物学家,不是一个合适的工作环境。可能成为生物安全4级实验室人员的人在考虑其进行这项工作之前,要对其隔离工作情况、是否熟悉所涉及的风险、是否精通生物安全2级和生物安全3级实验室微生物工作等情况进行评估。对其经验的这种评定,需由实验室主管和BSO在开始生物安全4级培训前和实习期结束前进行。
尽管生物安全4级实验室的安全记录良好,所有生物安全4级人员还都需要知晓,处理传染性物质时粗心或方法不当对人员和社区可能造成的风险。在生物安全2级实验室中出的事故与在最高等级隔离实验室中出的事故,其影响是不同的。在允许实验室人员进行最高隔离等级的工作前,应让他们有机会先在较低级的隔离环境中工作和学习。因那里最小的失误都可造成严重的后果。所有候选人员,包括有经验的、来自其他生物安全4级实验室的人员,都应交由实验室安全官员进行工作定位。有些人可能有保障方面的经验,如动物饲养或实验室设备的维护和修理。系统维修技工若要进入隔离状态中的实验室,可能需要对其进行穿戴防护服的培训。
医疗评估和监视
所有合格的生物安全4级实验室人员开始隔离条件下的工作前,都必须做医疗方面的评估,并告知其工作的风险。在评估中应该对雇员全面的健康情况、情感的稳定性、医疗情况和可能在使用的处方药等都给以考虑。要在雇用前对人员进行彻底的检查,确定其能力和身体状况是否适合这项工作。对生物安全4级的人员还要定期进行评估,确认他们的身体状况能够安全地完成所分配的任务。疲劳、幽闭症、精神上有问题和其他不好的迹象,将直接影响个人及其同事的安全。有癫痫病和不能在防护服中安全舒适工作的人,也有同样情况。
处方药和非处方药可能有副作用,或会引起短期心理或精神上的变化,可能使生物安全4级实验室中的工作不宜。对近期接受过外科治疗、身体上有残疾的人或怀孕的人,应按照生物安全4级工作的要求逐个进行评估。由于活动相当费力以及送到防护服内空气的脱水效应,所有穿防护服的人员都要注意水的摄入量,这点应该向所有将进行生物安全4级工作的人员解释清楚。熟知生物安全4级相关的活动、疾病症状和治疗方案的应急医生, 是最高等级隔离设施的宝贵资源。
虽然能应对生物安全4级病毒的疫苗极少,还是应该根据风险评定和实验室的要求, 向实验室人员提供这类疫苗及其他疫苗,如乙肝疫苗。必须针对人员的不明病患或发烧,制定报告与调查程序;应该就遵循这些程序的重要性对有风险的人员进行培训。BMBL建议采集并保存基准血清,但应以机构的政策为依据。接触疑似病毒性出血热的处理方法方面的具体建议已有出版(CDC,1988, 1995:CDC/W HO, 1998)。
培训
随着生物安全4级实验室数量的不断增加,对实验室中的工作人员、设施的运行和管理人员及生物安全人员进行培训,就非常关键。生物安全4级实验室是专业化的隔离区域,有其独特的工作规范,并对出入、媒介、废物处理有苛求要求。生物安全4级人员必须了解建筑的设计,知道如何识别正常和不正常的参数,如何在避免接触可能的致死病原体的同时应对出现的紧急情况(CDC/NIH,1999)。由于每个生物安全4级实验室有其独特的特性,设施安全官员必须使培训适合于当地的条件和法规要求。实验室主管负责确保每个生物安全4级实验室人员都精通工作。对所有批准进入生物安全4级实验室人员的培训,包括工作能力的测试,必须有文件记录并予以保存。设施安全办公室或设施出入管理办公室,还应该有培训的验证程序。
生物安全4级安全手册
受训人员必须阅读具体生物安全4级实验室的安全与运行手册及综合规约,它们亦可成为有经验人员知识更新的培训内容。因为实验室内的每个人在正常工作以及紧急情况的初始阶段,都必须能自我维系,所以生物安全手册应说明实验室的各种运行与保障人员的职责和责任,安全工作的程序,如何应对紧急情况,如何将材料运进运出最高等级隔离的实验室。处理服装事故、紧急医疗情况、可能接触生物安全4级媒介、溢出、火灾等情况时的标准工作程序,必须予以详细说明。手册应该提及的其他内容有: 动物处理、咬伤管理和尸体解剖程序;传染性媒介的贮存和运输要求;废物的管理,包括放射性和(或)高毒性物质的处置和处理;设备使用要点;专用房间的功能;实验室的特殊设计和隔离方面的事项。
实验室运行部分必须有设施、特别是通风和灭活系统的物理特性,以及如何识别并纠正故障。安全手册中应有实验室楼层的平面图,协助人员熟悉设备、紧急报警场所、高压消毒器、进出点和其他部分的位置。手册中应有紧急情况下的联系名录,并且至少每半年审核一次, 或主要人物变动时审核一次。安全规约的任何变动都要在实施前经高级安全人员和生物安全4级实验室主管审核批准,并向全体生物安全4级员工做详细解释。生物安全手册是一个活的文件,必须反应出经验、培训和当前的信息。生物安全4级工作水平的培训内容见表5。所需的培训表格、生物隔离区域的设计参数、设备目录、设备使用手册、伤害索赔表格、气闸及实验室灭活程序,可放在手册的附录中。
生物安全4级培训
申请进入生物安全4级实验室的人会收到实验室和相关保障空间及它们是如何运行的信息(见图5中穿戴防护服的生物安全4级实验室示意图),以及异常情况的处理程序。其中包括进出和安全保障的正常运行参数;空气处理和加热;呼吸用空气;报警系统;隔离的整体性;防火;废物管理系统,包括安全、生命保障和其他必须每日验证的隔离参数。虽然可以用视频来说明生物安全4级的运行,实验室的出、入及应急程序,但不能用其替代有经验的生物安全4级实验室人员所实施的基本培训。缺乏经验的受训人员在实验室内应随时有人陪伴,确保他们清楚了解生物安全4级环境与其他环境的区别。

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